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Aplicación 

Análisis de aminoácidos mediante Fast-GC-MS y la base de datos de metabolitos

Cuando se da comienzo a un nuevo análisis mediante GC-MS, es necesario determinar las mejores condiciones analíticas a través de un examen de los métodos de derivatización existentes, las columnas capilares, etc. Además, debe generarse una tabla de compuestos en la cual figure, junto al nombre de cada compuesto, su tiempo de retención, la relación masa/carga /m/z) del ión a utilizar para cuantificar, los iones de referencia, los espectros de masas, etc.

Cuando se da comienzo a un nuevo análisis mediante GC-MS, es necesario determinar las mejores condiciones analíticas a través de un examen de los métodos de derivatización existentes, las columnas capilares, etc. Además, debe generarse una tabla de compuestos en la cual figure, junto al nombre de cada compuesto, su tiempo de retención, la relación masa/carga /m/z) del ión a utilizar para cuantificar, los iones de referencia, los espectros de masas, etc.

La base de datos de metabolitos para GC-MS Shimadzu se ofrece para reducir el tiempo que consumen estas complejas operaciones. Contiene archivos de métodos con información pre-registrada de columnas y consumibles para diferentes compuestos de interés, así como condiciones analíticas adecuadas para su determinación incluyendo espectros de masa y índices de retención.

Esta nota de aplicación presenta como un ejemplo para análisis de alta velocidad de ácidos orgánicos y aminoácidos incluidos en la base de datos de metabolitos para GC-MS Shimadzu. Además, se incluye el método de análisis rápido de aminoácidos utilizando el kit EZ:faast® (Phenomenex), comercializado por Shimadzu GLC Co. Ltd.

EZ:faast®Analysis of Amino Acids EZ

EZ:faast® consiste en un kit que contiene reactivos para pretratamiento y derivatización de aminoácidos, una solución estándar de aminoácidos (33 compuestos), herramientas de pretratamiento y una columna analítica capilar. Las operaciones de pretratamiento y derivatización pueden completarse en 7 pasos (aproximadamente 7 minutos). El kit puede aplicarse no sólo a los 33 compuestos mencionados, sino que es útil para más de 50 aminoácidos y compuestos relacionados.

Base de datos de metabolitos para GC-MS Shimadzu

Este producto consta de cuatro tipos de bibliotecas de espectrales, en las que se encuentran pre-registrados los índices de retención y los espectros de masa de aminoácidos, ácidos grasos y ácidos orgánicos. También incluye 4 tipos de archivos de métodos con sus correspondientes condiciones analíticas pre-configuradas y condiciones de análisis de los datos (Tabla 1).

Tabla 1: Archivos de métodos y bibliotecas en esta base de datos

Analysis of Amino Acids Tabla1

Nota: Si los archivos de método de derivatización y bibliotecas incluidas en el EZ: Kit ® FAAST se van a utilizar, la medida debe llevarse a cabo utilizando 230 V, especificaciones del instrumento (horno de alta potencia), porque el programa de temperatura de la columna es rápido.

Análisis de aminoácidos utilizando EZ:faast®

En los análisis que se muestran en esta nota de aplicación se utilizaron los archivos de método y las bibliotecas de espectros de masas del kit EZ:faast® incluidos en la base de datos de metabolitos para GC-MS Shimadzu. Las condiciones analíticas se muestran en la Tabla 2; los datos registrados en las bibliotecas, en la Fig. 2.

TABLA 2: CONDICIONES ANALÍTICAS

Analysis of Amino Acids Tabla2

(a)

Analysis of Amino Acids Contents(a)

(b)

Analysis of Amino Acids Contents(b)

Fig.2 contenido del archivo de método (a) El cuadro compuesto

(b) Los espectros de masas (obtenidos de una muestra auténtica)**

Predicción de los tiempos de retención utilizando la función AART

Cuando se utiliza por primera vez los archivos de método incluidos en la base de datos de metabolitos para GC-MS Shimadzu, o cuando la columna se corta o se reemplaza, los tiempos de retención (guardados en archivo del método) registrados en la tabla de compuestos deben corregirse con los tiempos de retención para el instrumento en el que se utilizarán.

La función de ajuste automático del tiempo de retención (AART, Automatic Adjustment of Retention Time ) del software GCMSsolution permite predecir los tiempos de retención para los compuestos de interés a partir de los tiempos de retención obtenidos al inyectar una solución de n-alcanos y de los índices de retención registrados en el archivo del método, según el principio que se muestra en la Fig. 3.

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